超高效液相色譜借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測手段等技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。

　　超高效液相色譜儀使用時(shí)遇到以下故障應(yīng)該怎么處理

　　1.基線漂移偏大

　　(1)柱溫波動(dòng):控制好柱子和流動(dòng)相的溫度。

　　(2)流通池被污染或有氣泡:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。

　　(3)檢測器出現(xiàn)阻塞，高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線:取出阻塞物或更換管子，更換流通池窗需參考檢測器手冊。

　　(4)柱平衡慢:特別是流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)，用中等強(qiáng)度的溶劑沖洗，提前預(yù)約客戶，在分析前用10～20倍體積的新流動(dòng)相對柱子進(jìn)行沖洗。

　　(5)流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低純度溶液配成:使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及高效液相色譜(HPLC)級的溶劑。

　　(6)樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)(高K′值)以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線:使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過程中，用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。

　　(7)流動(dòng)相不均勻、配比不當(dāng)或流速有變化:在配制流動(dòng)相時(shí)應(yīng)充分搖勻，同時(shí)要根據(jù)目標(biāo)分離物和流動(dòng)相的極性合理配比，并保持流速恒定。

　　(8)柱子平衡時(shí)間短:HPLC色譜柱根據(jù)使用環(huán)境不同，平衡時(shí)間通常要控制在(30～60)min。

　　(9)檢測器沒有設(shè)定在吸收波長處:檢測器沒有設(shè)定在吸收波長處不僅影響檢測器的靈敏度和結(jié)果的度，還會(huì)使基線漂移加大，應(yīng)該將檢測器設(shè)定在吸收波長處。

　　2.噪聲偏大

　　(1)在流動(dòng)相、檢測器或泵中有空氣:流動(dòng)相脫氣，并沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。

　　(2)管路漏液:檢查管路接頭是否松動(dòng)，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。

　　(3)流動(dòng)相污染、變質(zhì)或有低純度溶液配制:使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑。

　　(4)溫度差異影響(柱溫過高，檢測器未加熱):減少差異或加上熱交換器。

　　(5)在同一條線上有其他電子設(shè)備:斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。

　　(6)檢測器/ 記錄儀電子元件的問題:斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。

　　(7)泵震動(dòng):在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器。

　　(8)檢測器燈能量不足:更換燈。

　　(9)色譜柱填料流失或阻塞:更換色譜柱。

　　3.重復(fù)性偏大

　　(1)峰型不佳(如峰拖尾、峰寬較大、分裂峰等都不利于峰面積的計(jì)算，造成重復(fù)性偏大):可以改變色譜柱條件，改變溫度、流速等參數(shù)，以獲得較尖銳的峰型，利于積分的性。

　　(2)泵流速不穩(wěn):可以根據(jù)泵流速檢定情況作出判斷，泵流速的穩(wěn)定性對峰面積的重復(fù)性影響非常大。例如:在其他條件不變的情況下，將流速由1.0mL/min改為0.5mL/min，結(jié)果保留時(shí)間加倍，峰面積也加倍，也可以看出峰面積在一定條件下基本與流速成反比。

　　(3)色譜柱影響:色譜柱固定相的流失，以及色譜柱對標(biāo)樣的吸收等都會(huì)影響檢測結(jié)果；特殊情況下還會(huì)發(fā)生柱子對樣品的不可逆吸收，建議使用替代柱。

　　(4)柱溫有變化:柱溫對保留時(shí)間有顯著影響，保留時(shí)間的變化直接影響積分面積的大小。因此應(yīng)保持柱溫恒定。

　　(5)進(jìn)樣器漏液:進(jìn)樣器漏液導(dǎo)致進(jìn)入色譜柱的樣品量發(fā)生變化，進(jìn)而導(dǎo)致峰面積發(fā)生變化，應(yīng)檢查進(jìn)樣墊等易損部件以排除漏液。

　　(6)樣品本身的影響:樣品降解或溶劑揮發(fā)都會(huì)導(dǎo)致重復(fù)性偏大，應(yīng)確定方法的性和采取措施控制揮發(fā)。